該試劑盒在冰凍切片的免疫熒光染色中表現(xiàn)出的性能。

　　

　　產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)：

　　

　　1、操作簡單,重復(fù)性好；

　　

　　2、較傳統(tǒng)方法能獲得更高信噪比科研圖片；

　　

　　3、節(jié)省抗體用量,比傳統(tǒng)方法節(jié)約20%-40%抗體用量；

　　

　　4、節(jié)約科研時間,只需要30分鐘，比傳統(tǒng)方法實驗速度提高約10倍；

　　

　　操作步驟：

　　

　　1、1、將組織浸泡入固定液中(TIF-1)，4℃固定24小時。(對于那些需要進(jìn)行灌注的動物：緩慢的用生理鹽水灌注直到流出的生理鹽水變澄清，然后快速的將組織取出進(jìn)行固定操作)

　　

　　2、再將組織浸泡在組織孵育緩沖液中(TIF-2)，4℃孵育48小時。

　　

　　3、將組織冰凍切片成10-20um的厚度，然后貼片到已經(jīng)用多聚賴氨酸包被的載玻片上，置切片到-20℃或-80℃保存待用。

　　

　　4、在常溫下，用試劑盒組分封閉液(TIF-3)將一抗和二抗稀釋成一抗和二抗抗體工作液。

　　

　　5、在常溫下，用試劑盒組分洗滌液A(TIF-4)孵育組織10min,然后用300ul洗滌液B(TIF-5)洗滌2次。

　　

　　6、用150ul一抗抗體工作液，4°C孵育組織過夜，然后用洗滌液B(TIF-5)洗滌組織3次，每次用300ul。

　　

　　7、用150ul二抗抗體工作液，常溫下孵育組織10min，然后用洗滌液B(TIF-5)洗滌組織3次，每次用300ul。（二抗操作，需要避光，以減少熒光淬滅。）

　　

　　8、封片劑封片，待干后顯微鏡成像。